淺談病理製片中固定液的選擇

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[論文關鍵詞]病理;固定液;甲醛;乙醇      [論文摘要]在病理組織診斷中製片過程尤爲重要,而在病理製片的過程中組織的固定更爲關鍵,故而對於石蠟切片,組織的固定則是必不可少的重要步驟。在多年的經驗中,筆者對AF、AAF及甲醛一生理鹽水三種混合固定液的優劣進行仔細分析、對比,從而認爲混合固定液與其他固定劑固定效果相比之下較爲優越。

淺談病理製片中固定液的選擇

由於病診斷是診斷的金標準,是輔助臨牀診斷的主要把關口,也是最後的宣判性診斷。做好病理診斷,層層步驟就顯得尤爲重要,包括組織的取材,固定,脫水,浸蠟,包埋及染色。組織的固定是一個關鍵的過程,因爲沒有好的固定就沒有好的製片,沒有好的製片就不會有好的成品,一張好的切片與固定有着密切的關係。

1 固定的目的

固定的概念是將採取的活體組織置於化學性溶媒(固定液)中,使其不發生自溶與腐化,保持被採取時的形態。

固定的目的是在於儘量使組織和細胞保持與生活時相仿的成分和形態,迅速防止組織、細胞的死後變化,防止自溶與腐化,使細胞內的蛋白質、脂肪、糖、酶等各種成分轉變成不溶性物質,使組織中的各種物質沉澱和凝固起來,而產生不同的折射率,造成光學上的差異,以便染色後易於鑑別和觀察。因此,固定的組織愈新鮮愈好,固定組織時,應使用足量的固定液。其固定液的量一般小於組織塊總體積的4倍以上。

2 固定液的選擇

固定液必需要有較強的滲透能力,能迅速地滲入組織內部,不會使組織過度收縮或膨脹,並且能使組織內易觀察的'成分可以凝固爲不溶性物質,能使組織達到一定的硬度,獲得較佳的折光率和對染料具有較強的親和力。組織細胞中不至於因固定引起人爲的改變,因爲在凝固原生質以後,增加了細胞對於各種穿透的抵抗力,不至於因以後的處理而使固定後的原生質變形,並儘可能地避免使組織膨脹或收縮,使細胞內的成分(蛋白質)凝固沉澱下來,由正常的半液體狀(膠體)變爲半固體狀(凝膠),增加媒染作用和染色能力,使組織能夠得到充分的固定,便於以後的蠟塊保存

固定液的種類很多,分爲單純固定液和混合固定液,其中混合固定液比較常用。

2.1常用單純固定液

2.1.1甲醛(formaldehyde)爲非沉澱性固定劑,是一種約有40%重量溶於水的氣體,易揮發,市售的爲40%的甲醛水溶液,也稱爲福爾**液(formalin)。此液久存自行分解,形成白色沉澱爲副醛(三聚甲醛或多聚甲醛)。用於組織固定的濃度爲10%,實際濃度含甲醛爲4%。其固定液滲透能力很強,固定均勻,對組織收縮小,故而對於免疫組織化學標本的製作常用此液。