淺析色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用

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淺析色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用
摘要:科學技術的發展,使得色譜技術也得到進一步的發展,不斷有新的聯用的技術得到應用。生物醫學的發展,也不斷要求高靈敏和高選擇性的方法對研究的對象進行定性和定量的研究。

關鍵詞:色譜柱 維護與保養 高壓液相色譜 應用

0 引言
色譜作爲一種分離技術與方法,自本世紀初起已經有100多年的歷史了,現在已經成爲分析化學學科中的一個重要的分支。在人類進入新時代之際,人們面臨着在信息科學、生命科學、材料科學、環境科學等領域的快速發展的挑戰,在這些領域人才的需求成爲國家高度發展的至關重要的因素。而色譜技術是生命科學、材料科學、環境科學必不可少的手段和工具。根據最近的統計在全世界各類分析儀器中氣象色譜儀和液相色譜儀的營銷總額佔25%-30%。
科學技術的發展,使得色譜技術也得到進一步的發展,不斷有新的聯用的技術得到應用。生物醫學的發展,也不斷要求高靈敏和高選擇性的方法對研究的對象進行定性和定量的研究。
1 色譜柱的相關性質
1.1 色譜柱的.定義:裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。多爲金屬或玻璃製作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。
1.2 分類:色譜柱可分爲填充柱和開管柱兩大類。液相色譜通常均採用填充柱。色譜柱的分離效果取決於所選擇的固定相,以及色譜柱的製備和操作條件。簡單而言:常見的分配住填料:碳十八柱(ODS/C18)、碳八柱(Octy了/C8)、碳六柱(Hexyl/C6)、碳四柱(Butyl/C4)、碳一注(Methyl/C1)、陰離子交換柱(SAX)、陽離子交換柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino/NH2)、氰基柱(Cyano/CN/Nitrile)。常見的吸附柱填料:硅膠柱
色譜柱的選擇會直接影響混合物中組分的分離。舉例來講:對於填充柱而言,可選擇的固定相較多,柱容量較大,但是受柱長的限制,分離能力有限,主要應用於簡單化合物的分離。
2 色譜柱的維護與保養
2.1 色譜柱的維護。我們在使用新的色譜柱應該在我們自己的液相色譜儀上進行性能測試,即使用色譜柱附帶的檢驗報告上測試條件和樣品來測定該色譜柱的柱效。並且,在以後的使用中,應時常對色譜柱進行測試。而且在使用的過程中常常有堵塞的現象,造成這種現象的主要原因是①溶劑中的不溶物②樣品中的不溶物③泵進樣器等中的不溶物④柱內不溶物的形成等。如果當色譜柱堵塞以後我們可以對色譜柱進行修復,首先,使用含鹽緩衝液後(如離子對試劑)應用溶解性強的溶劑(如水)進行沖洗。其次,先斷開檢測器,然後用對來自樣品中的物質有強溶解性的溶劑進行沖洗,對於反相色譜柱,可使用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等,在此條件下,應避免溶劑的pH低於2或高於8。最後如果經過上述還是沒有修復,色譜柱壓力還是沒有下降,則要斷開檢測器,將色譜柱反方向放置,然後檢查柱壓,若壓力穩定下降,則保持色譜柱反方向連接,用低於0.5 ml/min 流速沖洗一小時。如果壓力不下降,則要看內置過濾器是否被堵塞,如果被堵塞應沖洗或更換,若進口端的填料發生堵塞,柱子將不可能被徹底恢復,只能通過去掉進口端的部分填料,重新填充進行有限的柱效恢復。而且修復的厚度是2-5mm。
2.2 色譜柱的保養。色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,並將結果保存起來,作爲今後評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由於所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件),只有這樣,測得的結果纔有可比性。我們在對色譜柱使用前進行測試以後,我們要根據不同的情況對色譜柱進行保養:①反相色譜柱每天實驗後的保養:使用緩衝液或含鹽的流動相,實驗完成後應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。②長期保存色譜柱:如色譜柱要長時間保存,必須存於合適的溶劑下。對於反相柱可以儲存於純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存於嚴格脫水後的純正己烷中,離子交換柱可以儲存於水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,並將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。