關鍵詞： HCV 抗–HCV RNA ELISA RT-PCR
HCV檢測目前存在的主要問題有：1.由於HCV抗原結構的特殊性，直接檢測血清中HCV抗原的技術問題還未徹底解決。2.抗體（抗－HCV）出現時間晚，從HCV感染後到抗體轉陽的時間平均爲50～70天，有的患者可延長至6～9個月，檢測的“窗口期”較長。3.病毒基因型複雜而且容易變異，使基因水平的檢測質量不夠穩定。隨着有關人員近年來的不斷努力和相關科學的迅猛發展，已經在HCV檢測技術方面有了重要進展。
1 第三代抗－HCV試劑的應用
檢測丙型肝炎病毒抗體（抗HCV）仍是目前常用手段，這方面的檢測方法主要是第三代酶免疫測定法（EIA）或間接酶免疫法（ELISA），我國大多采用ELISA方法。
ELISA方法中包被抗原的組成和質量是關鍵因素。第三代ELISA試劑比第一、第二代試劑有明顯的改進，其包被的抗原爲HCV核心抗原NS3、NS4和NS5。由於第一、第二代試劑的重組基因多肽抗原中仍有SOD多肽，所以都存在抗－SOD造成的假陽性。而第三代HCV試劑，用中國北方地區HCV全基因序列，根據文獻開發的預測蛋白理化性質及三級結構和抗原決定簇的位點的序列軟件，完成了HCV全基因序列的.親水性﹑親近性﹑移動性分析，已預測到HCV抗原決定簇的位點。第三代試劑的特異性達到99%[4]。抗－HCV檢測可成爲丙型肝炎病毒早期感染的檢測指標[5]。
HCV感染通常是持續的終生感染。雖然第三代HCV抗體ELISA試劑增加了HCV Ns5區表達的蛋白作爲抗原，提高了試劑敏感性，HCV感染的“窗口期”通常還需要平均40多天。因此，第三代ELISA試劑仍需要提高和改進，例如在篩查試驗的特異性方面，仍存在假陽性結果。對強陽性或弱陽性樣本的檢測，國產試劑（主要廠家）的s/co值高於進口試劑，但是無論對陽性及陰性樣本檢測，國產試劑的CV值及特異性均明顯低於進口試劑，以致出現更多的假陽性結果。此外，丙肝抗體酶免試劑皆沒有灰區的設定，s/co比值較低（但大於１）的結果也報告陽性，亦是假陽性比較多的原因。[6]
2 丙型肝炎病毒抗原檢測方法的建立
多年來，專業人員一直探索能夠直接檢測HCV抗原，以達到縮短窗口期的目的。但是由於HCV抗原的特殊性和相關抗體制備中存在的困難，使這方面的進展受到阻礙。
2.1 HCV核心抗原檢測
HCV核心抗原是HCV感染者體內出現的早期感染指標，幾乎與HCV RNA同時出現，核心抗原和HCV RNA的動力學變化密切相關。
HCV核心抗原檢測用雙抗體夾心法定性或定量檢測血清樣品中的HCV核心抗原，其基本原理是：以基因工程核心抗原免疫小鼠後獲得的純抗HCV核心抗原單克隆抗體作爲固相包被物，用與固相包被物有不同抗原決定簇的抗-HCV核心抗原單克隆抗體作爲辣根過氧化物酶標記物，與血清中的HCV核心抗原反應，OPD顯色後進行定性或定量測定。該方法不受被檢測樣品中抗-HCV的干擾，檢測結果準確可靠。可用於HCV早期急性丙型肝炎診斷，抗-HCV陽性感染者的病毒血症分析以及HCV感染者治療前後病毒血症追蹤分析[7]。
有報道，HCV-CAg檢測可以較HCV抗體檢出時間提早23～46d[8]，且EIA法較PCR法簡便、快速，現有能力開展ELISA檢測的實驗室無需增加特殊設備，均可檢測。其結果與RT-PCR方法的複合率爲85.71%。因此，在不具備RNA檢測條件的實驗室開展HCV-CAg檢測時很好的篩查方法。有報道，在對180例抗-HCV陰性患者的篩查中，檢出HCV－CAg陽性2例，表明僅用抗－HCV檢測將有可能存在0.55%感染者漏診的風險，尤其是對手術前丙肝病毒篩查的病例，它涉及到術中感染責任和用血安全等問題。丙肝核心抗原檢測在一定程度上降低了這些風險。因此,丙肝核心抗原檢測可作爲HCV抗體檢測的補充試劑。