【關鍵詞】 清開靈注射液 尋常型銀屑病 T細胞
Effect of Qingkailing injection on CD3+，CD4+ and CD8+T cells in peripheral blood of patients with development psoriasis vulgaris
【Abstract】 Objective To definite the changes of CD3+，CD4+，CD8+ T cells in peripheral blood of patients with development psoriasis vulgaris （PV） investigate effect of Qingkailing injection on CD3+、CD4+、CD8+ T cells in peripheral blood of patients with PV.Methods 40 cases of PV were observed，20 cases were chosen randomly as treating group and the others as control group.20 cases were chosen randomly from the healthy persons as ents of the treating group injected with Qingkailin Injection (1ml/kg adding into 5%GS 500ml，once a day);and orally took Tuhuaiyin decoction 200ml，twice a day; and locally applied Jiaweihuangqingao twice a ents of the control group only orally took Tuhuaiyin decoction 200ml twice a day;and locally applied Jiaweihuangqingao twice a patients were treated for 4 weeks.Results CD3+，CD4+ and CD8+T cells of peripheral blood of patients with PV were all improved in the treating group and the control group.Conclusion Qingkailing injection has definitely effec on PV，and can correct the unbalance of CD3+，CD4+ and CD8+T cells in peripheral blood of patients with PV.
【Key words】 Qinkailing injection psoriasis vulgaris T cells
銀屑病是T細胞介導的自身免疫性疾病［1］。銀屑病患者存在免疫學異常，文獻報道銀屑病患者外周血T細胞及其亞群的變化結論不一。清開靈注射液治療銀屑病有效。清開靈注射液治療銀屑病的機制，文獻多從學的角度進行闡述，現代實驗研究相對缺乏。本試驗探討進行期尋常型銀屑病患者清開靈注射液治療前後外周血CD3+、CD4+和CD8+T細胞變化，從免疫學角度試圖闡述清開靈注射液對進行期尋常型銀屑病患者的療效。
1 資料與方法
1.1 一般資料 本試驗共收集進行期尋常型銀屑病完整資料40例，按住院先後隨機分為治療組和對照組，每組各20例。另選擇門診健康體檢者20例，作為健康對照組。
治療組：共20例，其中男12例，女8例；年齡最小者20歲，最大者55歲，平均年齡(33.95±10.92)歲，病程1年以內者2例，3年以內者7例，10年以內者9例，10年以上者2例；皮損形態：以點滴狀和混合型為主，PASI積分最小者10.9，最高者35，平均積分24.31±6.97。對照組：共20例，其中男9例，
女11例；年齡最小者18歲，最大者44歲，平均年齡(31.95±8.23)歲；病程1年以內者1例，3年以內者5例，10年以內者10例，10年以上者4例；皮損形態：以點滴狀和混合型為多；PASI積分最小者11.6，最高者32.7，平均積分22.96±7.75。
1.2 病例入選標準 上符合尋常型銀屑病診斷且為進行期；常規檢查除外其它器質性病變。入院期間及入院前1個月內未用皮質類固醇、免疫抑制劑、迪銀片和維A酸。
1.3 檢測方法及藥物提供 (1) 抽取患者及健康體檢者外周靜脈血3ml，加肝素(20u/ml)抗凝，用淋巴細胞分離液製備淋巴細胞懸液，採用間接免疫熒光染色後再用流式細胞儀檢測法測定T細胞亞群。取已製備的淋巴細胞懸液各100μl，分別加入1∶100稀釋的抗CD3+、CD4+、CD8+單株抗體即OKT3、OKT4、OKT8單株抗體(美國Dako公司產)100μl，室溫孵育30min，加入1∶200稀釋的二抗(羊抗鼠IgG-FITC)100μl，室溫孵育30min，最後加PBS液2ml上機檢測。試驗中用PBS液分別代替一抗、二抗作陰性對照。採用美國BD公司生產的FACSCalibur型流式細胞儀檢測，每份標本檢測10000個細胞，計數熒游標記陽性的細胞，測量的資料輸入，用相應的軟體程式進行資料處理，輸出資料結果，並進行t。(2) 清開靈注射液由山西太行藥業股份有限公司提供（批號：020301）；“加味黃芩膏”由江蘇省中醫院製劑室提供；中藥湯劑“土槐飲”的中藥飲片由江蘇省中醫院中藥房提供。
1.4 觀察指標和療效判定 (1)安全性檢測：血、尿、大便常規，肝、腎功能；(2)症狀積分改變情況：採用PASI積分系統，衡量銀屑病皮損受累面積及嚴重程度，實驗開始及實驗結束各記錄1次PASI積分；(3)患者治療前後及健康對照者的T細胞及其亞群。
1.5 學方法 全部資料資料採用統計學軟體 SPSS11.5軟體包進行統計學處理。計量資料用x±s表示，採用t檢驗，計數資料採用χ2檢驗。P＜0.05認為差異有顯著性，P＜0.01認為差異有非常顯著性，P＞0.05認為差異無顯著性。
2 結果
2組治療前後經配對t檢驗，P＜0.01，組間經t檢驗，P＞0.05，差異無顯著性，見表1。
表1 2組治療前後PASI積分比較 (x±s)
治療組在痊癒率、顯效率和總有效率都高於對照組，但經χ2檢驗P＞0.05，差異無顯著性，見表2。
表2 2組療效比較 (例)
注:痊癒率＝痊癒／n×100％；顯效率＝（痊癒＋顯效）／n×100%；總有效率=(痊癒+
顯效+好轉)/n×100%
表3 2組治療前後T細胞亞群變化情況 （x±s）
2組治療前CD3+、CD4+、CD8+T細胞均明顯低於健康對照組（P＜0.05），CD4+/CD8+明顯高於健康對照組（P＜0.05），治療後2組CD3+、CD4+、CD8+T細胞均有提高，CD4+/CD8+比值下降，治療組優於對照組（P＜0.05），見表3。
3 討論
中藥針劑清開靈注射液系在清代《溫病條辨》“安宮牛黃丸”基礎上由北京中大學研製的複方製劑。其主要藥物成分為：板藍根、金銀花、梔子、水牛角、珍珠母、黃芩苷、膽酸、豬去氧膽酸。清開靈注射液雖然不是為治療銀屑病而開發研製，該藥的主治病（證）中也沒包括銀屑病，但從該藥的藥物構成和功效來看，與銀屑病的病症相吻合，從中的角度可用於銀屑病的治療。“土槐飲”和“加味黃芩膏”是江蘇省中醫院面板科常用治療銀屑病的2個方劑，“土槐飲”主要由土茯苓、生槐花及其它中藥加減變化組成，全方有清熱解毒、涼血活血的功效；“加味黃芩膏”系江蘇省中醫院院內製劑，主要由黃芩、枯礬等藥物組成，具有清熱解毒、消炎止癢功效。以上三方同用，具有清熱解毒、涼血活血、消炎止癢的功效，達到改善銀屑病的目的'。
本試驗提示進行期尋常型銀屑病患者，治療前外周血CD3+、CD4+、CD8+T細胞明顯低於健康對照組（P＜0.05)，治療後患者T細胞及其亞群隨患者的症狀改善及PASI積分的降低而趨於正常，提示