研究太子參對急性心肌梗死心力衰竭大鼠心肌重構的作用

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摘要:目的: 研究太子參對左冠狀動脈前降支結紮所致急性心肌梗死慢性心衰大鼠心肌重構的作用,並探討其可能的機制。方法: 設假手術組、模型組、太子參高劑量組和低劑量組,後3組結紮大鼠冠狀動脈導致急性心肌梗死(AMI)複製慢性心衰大鼠動物模型,造模後1周,太子參組開始給藥5周;以死亡率、心肌重構指數分析心肌重構的程度,酶聯免疫吸附試驗(ELISA)分析血清中IL-6和TNF-α的水平。結果: 冠脈結紮6周後,模型組大鼠死亡率高達43.8%,心肺指數、心肌重構指數及血清中IL-6和TNF-α的水平顯著增加,與假手術組比較,差異顯著;而太子參組上述指標具有顯著改善作用。結論: 太子參對急性心肌梗死誘發的.慢性心衰具有一定的保護作用,其作用可能與太子參影響細胞因子有關。

研究太子參對急性心肌梗死心力衰竭大鼠心肌重構的作用

關鍵詞:孩兒參; 心力衰竭; 心肌梗死; 心肌重構; 白細胞介素6; 腫瘤壞死因子; 大鼠

急性心肌梗死(AMI)後誘發的慢性心衰是心血管系統疾患的主要死亡原因[1]。因此,防治心肌梗死後誘發心衰的心肌重構過程成為目前研究的焦點。隨着人們對化學藥品毒副作用的不斷認識,天然藥物由於毒副作用小,越來越受到人們的青睞。太子參是石竹科植物孩兒參Pseudostellaria heterophylla(Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.的乾燥塊根,具有益氣健脾、生津潤肺之功效。臨牀主要用於脾虛體倦,食慾不振,病後虛弱,氣陰不足,自汗口渴,肺燥乾咳等[2]。研究提示太子參含有環肽類、三萜皂苷類、多糖類等,具有抗疲勞、抗缺氧、抗應激、抗炎、抗衰老、增強免疫力、延長壽命以及鎮咳及抗菌抗病毒等藥理作用[3]。根據太子參的現代藥理作用與本室前期研究結果,2006年-2007年,研究了太子參對急性心肌梗死誘發心力衰竭心肌重構的作用及與炎症細胞因子的關係,為太子參資源的合理開發和有效利用提供實驗基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

藥材太子參Radix Pseudostellariae採自貴州省雷山縣方祥鄉貴州信邦太子參基地(獲得GAP資質認證),經貴陽醫學院生藥學與藥用植物學教研室龍慶德老師鑑定為石竹科植物孩兒參Pseudostellariaheterophylla(Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.的乾燥塊根。將太子參500 g置於燒瓶中,加常水煎藥至約500 ml,過濾後,藥渣再加適量水,煎至約250 ml,與第一次藥液合併,旋轉蒸發儀50 ℃減壓濃縮至250 ml,含生藥2 g/ml,備用。

1.2 試劑及儀器

IL-6、TNF-α ELISA分析試劑盒是博士德生物工程有限公司產品,ELX800酶標儀由美國GE公司生產,Eppendorf5417R冷凍離心機由德國Eppendorf AG生產。BS223S電子天平由德國sartorius生產,HX-300動物呼吸機是成都泰盟科技有限公司生產。

1.3 慢性心衰大鼠模型的製備[4]

體重250~280 g 雄性SD大鼠,10%水合氯醛腹腔注射(3 ml/g),大鼠四肢固定在手術枱上,人工呼吸機呼吸頻率55次/min,潮氣量18~25 ml。胸部去毛、消毒,沿左鎖骨中線縱向切開皮膚約2 cm,打開胸腔,剪開心包,輕壓右側胸廓,擠出心臟。用醫用縫合線在動脈圓錐與左心耳之間冠狀靜脈處結紮左冠狀動脈前降支,把心臟迅速放回胸腔。排盡氣體,縫閉胸腔,恢復大鼠自主呼吸,停止人工呼吸。假手術組大鼠冠脈穿線但不做結紮手術。

1.4 分組及給藥

實驗分為假手術組(Sham)、模型組(Model)、太子參(RP)高劑量組(20 g/kg)、太子參低劑量組(10 g/kg);實驗結束時,保證各組至少有8只動物存活。太子參組造模後1周開始給藥,連續給藥5周。

1.5 觀測指標

記錄各組大鼠結紮冠脈1周至給藥結束的死亡數,計算死亡率。心室及肺重量、重量指數測定[5]:股靜脈注人10%KCl 1~2 ml,使心臟停搏於舒張期,開胸取出心臟,用PBS洗去血液,濾紙吸去水分後用電子天平(精確到1 mg)分別稱取左心室(含室間隔)與肺的重量及與體重比,得到左室、肺指數。心室重構指標測定[6]:用遊標卡尺測量左室前壁(心梗區)厚度、左室後壁(非梗死區)厚度、室間隔厚度、左室長徑、左室內徑、球形指數(L/R)、左心室前壁厚度和左室內徑比值(LVAW/R)均採用雙盲法測定,同一標本測量3次,取均值。IL-6與TNF-α檢測[7]:大鼠頸總動脈放血,室温放置自凝後,1 500r/min離心,取上層血清放入-70 ℃超低温冰箱待測。收集標本後,用ELISA測定。