電針和半夏瀉心湯對功能性消化不良大鼠胃動素的影響

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功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是慢性持續或反覆發作的上腹痛或不適、腹脹、噯氣、早飽、厭食、噁心、嘔吐、燒心、胸骨後隱痛或反胃等,病程超過12周以上,經各項檢查排除器質性疾病的一組消化內科的臨牀症候羣[1]。現代醫學多采用促動力藥、質子泵抑制劑、粘膜保護劑和抗抑鬱劑等藥物治療[2],中醫藥多施以鍼灸和調理脾胃的方藥,如調和脾胃之代表方劑半夏瀉心湯。本研究觀察了電針和半夏瀉心湯單用及合用對FD模型大鼠血漿、胃竇及下丘腦組織中胃動素(motilin,MTL)含量的影響,現報道如下。
    1  材料與方法

電針和半夏瀉心湯對功能性消化不良大鼠胃動素的影響

    1.1  動物與分組

    健康成年SD大鼠,共60只,體質量爲180~250g,雌雄不拘,由安徽省全椒安立實驗動物有限公司提供,實驗動物生產許可證:SCXK(蘇)2002-0002。大鼠隨機分爲6組,每組10只,即正常對照組(常規飼養,未作任何處理)、模型組(夾尾刺激處理造模)、西藥組(造模後給予2.82g·kg-1· d-1枸櫞酸莫沙必利水溶液灌胃治療,連續7 d)、電針組(造模後給予電針治療)、中藥組(造模後給予中藥灌胃治療)、電針加中藥組(造模後給予電針及中藥灌胃治療)。

    1.2  藥品與儀器

    氨基甲酸乙酯(烏拉坦),批號960101,由上海化學試劑採購供應站提供;PCE程控電針治療儀,由安徽中醫學院鍼灸經絡研究所研製;MTL放免藥盒,由解放軍總醫院科技開發中心放免所(原北京東亞免疫技術研究所)提供。

    1.3  FD模型複製

    參照文獻[3]介紹的方法,採用夾尾刺激引發大鼠打鬥。結果大鼠出現緊張、焦慮反應,進食量明顯減少,毛色變暗、枯黃、不順,與上述文獻報道基本一致,說明造模成功。

    1.4  中藥製備

    半夏瀉心湯水煎劑所用中藥購自安徽中醫學院第一附屬醫院中藥房,經安徽中醫學院藥學院中藥教研室鑑定,均爲正品。生藥劑量比例按原方根據文獻[4]方法換算,取人用劑量(3.3g/kg)的10倍。藥物以蒸餾水煎煮30min,提取2次,合併煎液並過濾,水浴加熱蒸發濃縮爲1g/mL,貯於冰箱中備用。造模後以33g·kg-1·d-1劑量開始給藥,每日1次灌胃,連續7 d。

    1.5  電針處理

    造模後,將大鼠放置於特製的固定器內,動物保持清醒安靜狀態,根據"大鼠穴位圖譜"(江蘇省中醫藥研究所華興幫研究員等用模擬骨度法繪製而成),選取大鼠雙側"足三裏"穴(ST36)爲針刺穴位。實驗開始時將大鼠左右後肢膝關節外下方(即腓骨小頭下方)體毛除去,確定穴位(腓骨小頭下方5mm處)後用苦味酸作標記,1寸毫針刺入。以電針儀給予電刺激,頻率爲20~100 Hz的疏密波混頻刺激,輸出電壓4~6 V,以大鼠下肢輕微顫抖爲度,持續電針20min,每日1次,連續7 d。

    1.6  取材

    禁食24 h,取材前用氨基甲酸乙酯(烏拉坦)1.0g·kg-1腹腔注射麻醉大鼠後,進行標本採集。

    廣州中醫藥大學學報2007年第24卷第5期方正清,等.電針和半夏瀉心湯對功能性消化不良大鼠胃動素的影響1.6.1  血液採集  打開腹腔,由腹主動脈採血;取血1.5 mL置於含100g/L乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)30μL和抑肽酶30μL試管中混勻,室溫放置20min,4℃、3 500r/min離心20min,取血漿-20℃保存,用於測定血漿MTL的含量。

    1.6.2  胃、腸組織採集  取近幽門部胃竇組織,用電子天平迅速稱質量後以m胃組織:V生理鹽水=1∶5的比例放入煮沸的生理鹽水中繼續煮沸3min,加入1mol/L冰醋酸0.5mL於勻漿器中製成勻漿,放置1~2h,再用相應體積的1mol/L NaHCO3中和,4℃、3 000r/min離心30min,取上清液,-20℃保存,用於測定胃竇組織中MTL的含量。取空腸起始段近端腸組織,迅速稱質量後製成勻漿(方法同胃竇組織),4℃、3 000r/min離心30min,取上清液,-20℃保存,用於測定腸組織中MTL的含量。

    1.6.3  腦組織採集  快速剝離大鼠腦組織,按照文獻[5]所標記的相應位置,在冰盤上切取大鼠下丘腦,迅速稱質量後製成勻漿(方法同胃竇組織),於4℃、3 000r/min離心30min,取上清液,-20℃保存,用於測定下丘腦組織中MTL含量。

    1.7  檢測方法

    採用放射免疫法檢測,嚴格按照試劑盒說明書方法進行。

    1.8  統計學處理

    採用SPSS for Windows 11.0軟件分析。

    2   結果

    表1結果顯示,模型組血漿、胃竇組織、空腸組織、下丘腦組織中的MTL含量下降,與正常對照組比較,差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01);各治療組與模型組比較,血漿、胃竇組織、空腸組織及下丘腦組織MTL含量均顯著性升高(P<0.01);電針組胃竇組織MTL含量及電針組、中藥組下丘腦組織MTL含量與電針加中藥組比較,差異均有顯著性意義(P<0.01)。

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